1．实践课程号：（由教务处统一编号）

2．学分：1

3．实践教学时间安排：秋季学期

4．先修课程：生物化学、有机化学、分析化学、水产动物营养学等

一、实践教学的性质与任务

实践教学是水产动物营养学教学过程中不可缺少的一个环节，可使学生进一步巩固课堂教学理论知识、丰富教学内容，达到理论与实践相结合的目的。本课程综合实习的任务主要是使学生通过学习和操作技能锻炼，掌握饲料常规成分分析的操作方法，熟悉实验室饲料常规成分检测常用仪器设备的使用和操作，从而使其能够胜任水产动物营养试验研究工作、饲料分析、质量检测、饲料营养价值评定工作以及能够胜任饲料分析实验室的规划与建设工作。

二、实践的目的与基本要求

实践教学的目的是使学生加深对基础知识和基本理论的理解，提高学生的基本技能和实际动手能力，培养学生严谨的科学态度和良好的研究习惯，加强学生综合能力的培养。要求学生通过实际操作，掌握主要饲料常规成分分析的基本方法，加深对饲料营养成分的认识和饲料营养价值评定的理解，并提高对饲料品质优劣的识别能力。

三、考核方式及办法：

考核方式：考查

实习成绩评分办法或标准：采用百分制，根据课堂上的动手操作情况以及实习报告的完成情况综合评定。

四、教学内容与时间安排：

水产动物营养学综合实习安排一览表

阶段	内容	时间安排	面向专业	天数
1 2 3 4 5 6 7	饲料样本的采集、制备与保存 饲料中水分的测定 饲料中粗灰分的测定 饲料中粗蛋白质含量测定 饲料中粗脂肪含量测定 饲料中总磷含量测定 饲料中总能量的测定	第1～2天 第2天 第2天 第3天 第4天 第4天 第5天	水产养殖和水族科学 水产养殖和水族科学 水产养殖和水族科学 水产养殖和水族科学 水产养殖和水族科学 水产养殖和水族科学 水产养殖和水族科学	1 0.5 0.5 1 1 0.5 1

五、实践教学中应注意的问题

1．组织管理的要求： 

认真按照课程实习安排时间，按大纲要求及时组织实习指导老师和实验员做好各项准备工作，确保完成实习任务。

2．对教师的要求：

（1）本着高度负责的态度，对实习进行全程悉心指导；

（2）实习开始前应对当次实习进行认真准备，包括饲料样本、仪器和药品准备、实习组织安排等；

（3）每天应提前到实验室做好当天实习所需设备和用具的准备工作；

（4）认真组织实习考试，实习结束后认真检查实习记录和批改实习报告，并进行实习总结。

3．对学生的要求：

（1）认真按照大纲要求按步骤按计划完成所规定内容；

（2）实习要细心观察，勤动手、勤提问并及时作好记录；

（3）严格遵守实验室各项制度守则，爱护各种仪器设备，不得损坏、遗失；

（4）实习期间，严格按照学校的作息时间按时上、下课，不得迟到、早退、旷课；

（5）必须一切行动听从指导教师的指挥；

（6）保持实验室的整洁，每天须安排人打扫实验室卫生。

4．对教学基地、实验室和实验员的要求：

教学基地：作为校内专业教学基地，应无条件满足教学实习各种采样。

   　　实验室和实验员：实习期间动物营养实验室对实习班级全部开放，可让班长掌管一把实验室钥匙，实验员负责实验室安全、仪器设备领用管理等。

六、分阶段的具体内容：

第一阶段   饲料样本的采集、制备与保存实践的具体内容

　　1. 本阶段的目的和要求

  　　要求掌握饲料分析用样本的采集、制备与保存应遵循的原则与方法。

2. 实践内容

样本的采集方法；

新鲜样本和风干样本的制备；

样品的保存。

3. 需用的仪器、试剂或材料等

    　　40号网筛，铲子，广口瓶，粉碎机

4. 实践步骤或环节

    　　根据物料性质采样 粉碎 四分法取样装入广口瓶中保存

5. 教学方式

    　　教师示教后，学生独立实习操作。

6. 考核要求

    　　能根据物料的特性采用适当的方法采集分析样本、制备并贮存样本

7. 实践教学报告要求

无具体要求。

第二阶段    饲料中水分含量测定实践的具体内容

1. 本阶段的目的和要求

  　　要求掌握饲料中初水分和吸附水的概念与测定方法；

掌握饲料中总水分和干物质含量的计算方法，并了解饲料中水分含量情况。

2. 实践原理

    　　鲜样样本在65~70 ℃温度下烘至重量不变时减少的重量即为样本中初水分含量；风干样本在100~105 ℃温度下烘至重量不变时减少的重量即为吸咐水含量；以饲料总量为100 %，减去总水分含量，即为饲料中干物质量。

3. 需用的仪器、试剂或材料等

    　　电热式恒温烘箱、分析天平、铝盒、干燥器

4. 实践步骤或环节

将洁净铝盒在105 ℃烘箱中烘1 h取出在干燥器中冷却30 min称重再烘30 min 冷却，称重至前后两次质量之差小于0.0005 g为恒重；用已恒重的铝盒称两份平行样，每份约2 g，精确至0.0002 g置于105 ℃条件下烘3-4 h（盖半合）取出冷却30 min，称重同样烘1 h，冷却称重重复上述步骤至前后两次质量之差小于0.002 g为恒重。

5. 教学方式

    　　教师示教后，学生独立实习操作。

6. 考核要求

   　　现场考核实验操作的掌握情况；从实验报告了解操作与结果。

7. 实践教学报告要求

按实验报告格式书写报告，对实验结果进行分析总结并找出原因。

第三阶段    饲料中粗灰分含量测定实践的具体内容

1. 本阶段的目的和要求

  　　加深对粗灰分概念的理解；掌握粗灰分的测定方法。

2. 实践原理

    　　饲料中有机物的主要元素如氮、氢、氧、碳等在550 ℃燃烧后被氧化而逸失，所剩残渣除含各种矿物质元素的氧化物外，还含有少量杂质，故称粗灰分。

3. 需用的仪器、试剂或材料等

    　　分析天平、高温炉、坩埚、坩埚钳、干燥器

4. 实践步骤或环节

    　　将干净坩埚放入高温炉，在550±20 ℃下灼烧30 min。取出，在空气中冷却约1 min，放入干燥器冷却30 min，称其重量。再重复灼烧，冷却、称重，直至两次重量之差小于0.0005 g为恒重；在已知重量的坩埚中准确称取2 g试样，在电炉上小心炭化至无烟，尔后放入550±20 ℃高温炉中灼烧3 h。取出，在空气中冷却约1 min，放入干燥器中冷却30 min，称其重量。再同样灼烧1 h，冷却、称重，直至两次重量之差小于0.001 g为恒重。

5. 教学方式

    　　教师示教后，学生独立实习操作。

6. 考核要求

    　　现场考查学生实际操作情况；实验报告的考查。

7. 实践教学报告要求

   　　按实验报告格式书写报告，对实验结果进行分析总结并找出原因。

第四阶段    粗蛋白质含量测定实践的具体内容

1. 本阶段的目的和要求

  　　巩固与加深粗蛋白质与真蛋白质概念的理解；掌握凯氏定氮法测定饲料CP含量的原理、方法及有关计算。

2. 实践原理

    　　样品中有机物在混合催化剂的作用下，用浓硫酸进行消化，使含氮物质转化成硫酸氨，而非含氮物质则以二氧化碳、水、二氧化硫的气态逸出。在硫酸氨溶液中加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸液吸收使其结合为硼酸氨，然后用标准盐酸液滴定，根据消耗标准盐酸的量计算出样本的氮量，将结果乘以蛋白质换算系数（一般用6.25），就得到粗蛋白（蛋白质、硝酸氨、氨盐、酰氨）含量。

3. 需用的仪器、试剂或材料等

    　　浓硫酸、混合催化剂(五水硫酸铜／硫酸钠 = 1／14)、40 % 的NaOH、硼酸、甲基红-溴甲酚绿指示剂、盐酸标准液；分析天平、消煮炉、改良式半微量定氮仪、消煮管、移液管、洗瓶、洗耳球、量筒。

4. 实践步骤或环节

样品消化：称取样品0.5 g左右放入消煮管，加3 g混合催化剂，混合均匀加15 ml 浓H2SO4及两粒玻璃珠消煮炉上加热，先250 ℃使其炭化，然后再用360-410 ℃（390℃）消煮至溶液呈透明蓝绿色，然后继续加热1 h,完毕；定容：消煮管冷却后加入20 ml蒸馏水转入100 ml容量瓶，用蒸馏水冲洗消煮管，冲洗液一并转入容量瓶冷却，摇匀，定容，即为试样分解液；蒸馏：将改良式半微量定氮仪装妥当。样品测定前用蒸馏水洗净反应室。取2 % 硼酸溶液10 ml于150 ml锥形瓶中加指示剂2滴，置于冷凝管下，使管口浸入液面蒸发室注入一定量的水，点燃酒精灯，置蒸馏装置下，通冷凝水准确量取5 ml试样分解液注入反应室，加10 ml 40 % NaOH用少量蒸馏水冲洗入口漏斗，然后夹紧用水封漏斗，以防漏气待反应室内溶液煮沸约5 min后，使冷凝管末端离开液面，继续蒸馏1 min 用蒸馏水冲洗冷凝管末端，用红色石蕊试纸检测至不变色为止。滴定：用0.01 mol/L盐酸标准溶液进行滴定，吸收液由蓝绿色变为灰白色即为终点，准确记录标准盐酸消耗的体积。

5. 教学方式

    　　教师示教后，学生独立实习操作。

6. 考核要求

   　　现场考核实验操作的掌握情况；从实验报告了解操作与结果。

7. 实践教学报告要求

    　　按实验报告格式书写报告，对实验结果进行分析总结并找出原因。

第五阶段    饲料中粗脂肪含量测定实践的具体内容

1. 本阶段的目的和要求

掌握饲料中粗脂肪含量的测定方法；了解常用饲料粗脂肪含量。

2. 实践原理

    用乙醚反复浸提饲料中的脂肪，并使溶有脂肪的乙醚流集于盛醚瓶中，然后将乙醚蒸发，瓶中提取物的重量即为脂肪量。饲料中溶解于乙醚的物质，除去真脂肪外，还包含部分的麦角固醇、胆固醇、脂溶性维生素、叶绿素及其他有机物质，故称粗脂肪。

3. 需用的仪器、试剂或材料等

    恒温水浴锅、索氏脂肪抽提仪、分析天平、铝盒、干燥器、恒温干燥箱；无水乙醚

4. 实践步骤或环节

称样：约2 g左右，精确至0.0002 g，脱脂滤纸打包，用脱脂棉线扎牢，编号，放入已编号铝盒中，105 ℃下，烘4-5 h，冷却，称重，至恒重；浸提：烘干后的滤纸包用长镊子将其放入浸提管中，60-70 ℃水浴加热，乙醚回流速度控制在10次/小时为佳，至浸提管流出乙醚挥发后不留下油迹为浸提完毕；干燥：浸提结束后取出滤纸包放入原铝盒，待乙醚挥发后，放入烘箱中105 ℃至恒重。

5. 教学方式

教师示教后，学生独立实习操作。

6. 考核要求

现场考核实验操作的掌握情况；从实验报告了解操作与结果。

7. 实践教学报告要求

按实验报告格式书写报告，对实验结果进行分析总结并找出原因。

第六阶段    饲料总磷含量测定实践的具体内容

1. 本阶段的目的和要求

掌握饲料总磷含量的测定方法；了解常用饲料总磷含量。

2. 实践原理

    样本经处理后，含有的磷已成为各种形式的磷酸盐。在酸性条件下，磷酸根离子与钼酸铵结合为钼酸磷铵，钼酸磷铵遇还原剂对氢醌即变成“钼蓝”的蓝色物质，其蓝色的深浅在一定范围内与溶液中磷的含量呈成正比关系，于是根据所产生“钼蓝”蓝色的深浅，在波长650nm下进行比色测定，即可计算出样本的含磷量。

3. 需用的仪器、试剂或材料等

    钼酸铵、对氢醌、亚硫酸钠、标准磷溶液；分析天平、分光光度计、比色管、移液管、洗瓶。

4. 实践步骤或环节

标准曲线的制作：取25 ml比色管13支，分别编上号码0、1、2……12。在0号管中放入蒸馏水少许，在1、2……12各管中分别加入0.5、1、2……11 ml的标准磷溶液；在每个比色管中依次加入钼酸铵2 ml、亚硫酸钠1ml和对氢醌1 ml。每个比色管内加蒸馏水稀释至25 ml，摇匀，静止半小时；以0号管溶液为空白，在分光光度计上(波长为650 nm)测定每个比色管内溶液的光密度，在坐标纸上，以光密度为横轴，以浓度为纵轴(每个比色管中含磷量ug)，绘出其标准曲线。

样本中磷的测定：吸取样本分解液1 ml于25 ml比色管中，依次加入钼酸铵2 ml、亚硫酸钠1 ml和对氢醌1 ml，再加入蒸馏水稀释至25 ml刻度，摇匀，静止半小时后比色；以空白溶液作空白，在分光光度计上(波长为nm)测出光密度。根据样本液的光密度，在标准曲线上查出其磷的量。

5. 教学方式

    教师示教后，学生独立实习操作。

6. 考核要求

现场考核实验操作的掌握情况；从实验报告了解操作与结果。

7. 实践教学报告要求

按实验报告格式书写报告，对实验结果进行分析总结并找出原因。

第七阶段    饲料总能量测定实践的具体内容

1． 本实践的目的和要求

掌握饲料总能量含量的测定方法；了解常用饲料总能量含量。

2．实践原理

饲料的燃烧热即饲料所含的总能。氧弹式热量计测定样品燃烧热的原理：将一定重量的饲料样本装于热量计的氧弹中，通电引火，使试样在纯氧条件下进行彻底燃烧。燃烧所放出的热量被氧弹周围的一定量水吸收，根据燃烧前后水温的变化和热量计水当量，可算出该样本中所含热量。

3．需用的仪器、试剂或材料等

　　氧弹式热量计、压样机、铁坩埚、引火丝、镊子及分析天平等

4．实践步骤或环节

　　压样称样装引火丝样品装入氧弹、充氧氧弹放入氧弹式热量计开始测试测试结束，读取数据。取出氧弹，打开气阀，放去弹筒内剩余氧气和二氧化碳，拧开螺帽，取下弹头于弹头座上，检查是否燃烧完全，用蒸馏水仔细冲洗氧弹内壁、坩埚及进气阀、导气管等各部分，用纱布将氧弹等擦干净，并用电吹风将其接触部分吹干。

5．教学方式

　　教师示教后，学生独立实习操作。

6．考核要求

　　现场考核实验操作的掌握情况；从实验报告了解操作与结果。

7．实践教学报告要求

　　按实验报告格式书写报告，对实验结果进行分析总结并找出原因。

七、教材及主要参考资料

　　贺建华主编.饲料分析与检测.北京：中国农业出版社，2005。

十、教改说明及其他

　　　　　　　　　　　　　课程负责人：动物科学技术学院，赵玉蓉

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　二00八年一月